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稀釋倍數(shù)過大或過小都會(huì)導(dǎo)致5d耗氧量過少或過多，超過正常耗氧量范圍就會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。但由于BOD5的測(cè)量周期較長(zhǎng)，一旦出現(xiàn)這種情況，就不能原樣補(bǔ)測(cè)。因此，必須高度重視稀釋倍數(shù)的確定。 雖然工業(yè)廢水成分復(fù)雜，但BOD5值與CODCr值之比通常在0.2~0.8之間。造紙、印染、化工等行業(yè)廢水占比較低，食品行業(yè)廢水占比較高。一些含有顆粒有機(jī)物的廢水，如酒糟廢水等，在測(cè)定其BOD5時(shí)，由于顆粒物在培養(yǎng)瓶底部沉淀，不能參與生化反應(yīng)，導(dǎo)致比例明顯降低. 稀釋倍數(shù)的確定是根據(jù)測(cè)定BOD5時(shí)，5d耗氧量應(yīng)大于2mg/L，剩余溶解氧應(yīng)大于1mg/L這兩個(gè)條件為原則的。稀釋后第二天培養(yǎng)瓶中的DO為7-8.5mg/L。假設(shè) 5d耗氧量為 4 mg/L，稀釋倍數(shù)為 CODCr 值分別與 0.05、0.1125 和 0.175 三個(gè)系數(shù)的乘積。例如，在250mL培養(yǎng)瓶中測(cè)定CODCr為200mg/L的水樣BOD5時(shí)，三種稀釋比例分別為：①200×0.005=10倍，②200×0.1125=22.5倍，③200×0.175=35倍.若采用直接稀釋法，則取水樣體積為：①250÷10=25mL，②250÷22.5≈11mL，③250÷35≈7mL。 根據(jù)本次采樣培養(yǎng)，會(huì)有1-2個(gè)溶氧測(cè)量結(jié)果符合以上兩個(gè)原則。如果有兩個(gè)稀釋比符合上述原則，計(jì)算結(jié)果時(shí)應(yīng)取平均值。如果剩余溶解氧小于1mg/L甚至為零時(shí)，則應(yīng)增加稀釋比。如果培養(yǎng)期間的溶解氧消耗量小于2mg/L，一種可能是稀釋倍數(shù)過大；另一種可能是微生物菌種不適應(yīng)，活性較差，或者有毒物質(zhì)濃度過大，此時(shí)還可能出現(xiàn)稀釋倍數(shù)大的培養(yǎng)瓶消耗溶解氧反而較多的現(xiàn)象。 如果稀釋水是接種稀釋水，由于空白水樣品的耗氧量為0.3-1.0 mg/L，因此稀釋因子分別為0.05、0.125和0.2。 如果已知水樣的具體CODCr值或大致范圍，根據(jù)上述稀釋倍數(shù)就可以很容易地分析出BOD5值。當(dāng)水樣的CODCr范圍未知時(shí)，為了縮短分析時(shí)間，可以在CODCr測(cè)定時(shí)進(jìn)行估算。具體方法是：先配制每升含0.4251g鄰苯二甲酸氫鉀的標(biāo)準(zhǔn)溶液（該溶液的CODCr值為500mg/L），然后按比例稀釋成CODCr值分別為400mg/L、300mg/L、200mgL、/100mg/L的稀溶液。分別吸取CODCr值為100～500mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液20.0mL，按常規(guī)方法加入試劑，測(cè)定CODCr值。加熱、煮沸、回流30min后，自然冷卻至室溫，加蓋保存，制成標(biāo)準(zhǔn)比色系列。在按照常規(guī)方法測(cè)定水樣CODCr值的過程中，煮沸回流30分鐘時(shí)，以預(yù)熱后的標(biāo)準(zhǔn)CODCr值顏色進(jìn)行對(duì)比，估算出水樣的CODCr值，并據(jù)此確定化驗(yàn) BOD5時(shí)的稀釋倍數(shù)。對(duì)印染、造紙、化工等工業(yè)廢水中含有難降解有機(jī)物時(shí)，必要時(shí)煮沸回流60分鐘后進(jìn)行比色估算。
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